生命科学実験２

授業テーマ	動物細胞を用いた細胞生物学実験の基本技術を習得するとともに、細胞分化誘導実験を体験する。
授業のねらい・到達目標	一般的な動物培養細胞（ヒトがん細胞）の扱い方を学ぶ。前半では、動物培養細胞への導入遺伝子の発現観察と、内在性タンパク質の検出を行う。アポトーシス細胞の観察も同時に行う。後半では、マウスES細胞（胚性幹細胞）の分化誘導法を学ぶ。学習する技術は、細胞培養、細胞形態観察、免疫沈降、ウエスタンブロット、免疫染色、分化誘導、細胞染色（核染色、分化細胞の検出）である。
授業の方法	実験室での作業をメインとし、４～５人のグループに分かれ、動物培養細胞を用いた実験を中心に行う。レポート提出、成果発表を行う。
事前学修・事後学修，授業計画コメント	ガイダンスで渡す資料を、それぞれの実験の前に熟読してください。

授業計画
1	ガイダンス：実験についての全般的注意
2	細胞培養１：培養液の調整、凍結保存細胞の解凍と細胞の観察
3	細胞培養２：細胞の継代、細胞の凍結保存
4	細胞生物学実験１： GFP発現細胞の観察と細胞核染色、導入遺伝子の推
5	細胞生物学実験２：細胞の回収とGFP融合タンパク質免疫沈降前半
6	細胞生物学実験３：免疫沈降後半
7	細胞生物学実験４：免疫沈降産物のウエスタンブロット前半
8	細胞生物学実験５：ウエスタンブロット後半、免疫沈降の評価
9	細胞生物学実験６：免疫染色（核膜、ミトコンドリア、細胞骨格など予定）
10	細胞分化誘導１： ES細胞の観察と継代、分化誘導
11	細胞分化誘導２：分化細胞の検出（アルカリフォスファターゼ染色）
12	細胞分化誘導３： ES細胞の神経系分化誘導細胞観察、成果発表に向けた準備
13	成果発表会（各班の発表と質疑応答，総合討論）
14	総括1（実験全体について配布資料などを用いて復習を行い，その上で質疑応答を行う）
15	総括2（実験全体についての解説やレポート評価を行い，実験内容の理解を深める）

その他
成績評価の方法及び基準	レポート(30%)、授業参画度(70%)
オフィスアワー	授業終了後